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毕赤酵母每吨成本

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2021-04-16T05:04:55+00:00

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毕赤酵母（Pichia pastoris）是一种常用的细胞工厂底盘细胞，十分安全且易于低成本培养。但表达出的外源蛋白质常常活性很低，这是由于蛋白质没有正确折叠造成的。事实上，绝大部分外源蛋白质在低等生物工程化表达体系中（包括细菌、酵母）都难以正确折叠，易形成包涵体或者被降解，难以得到可溶性、活性强的蛋白质。这使得许多高价值的 6000～8000rpm离心收集酵母菌体重悬酵母于1ml YPD培养基，30℃摇床孵育 1～4h后，取25～100ul菌液铺选择性培养基平板，于30℃培养2～3天鉴定毕氏酵母PEG1000转化法（1）试剂缓冲液A：10M Sorbitol，10mM Bicine，pH835（sigma）,3%（v/v）ethylene glycol 缓冲毕氏酵母（Pichia pastoris）感受态细胞制备及转化知乎（3）酿酒酵母是真核生物，可以对蛋白进行翻译后加工；（4）表达产物可分泌表达，易于纯化；（5）酿酒酵母生长迅速、工艺简单、成本低；（6）遗传背景清楚，易进行操作。但也有不足: （1）对真核基因产物的翻译后加工与高等真核生物有所不同，重组蛋白常发生超糖基化，每个N一糖基链上都含10 0个以上的甘露糖，是正常的十几倍；酿酒酵母表达系统与毕赤酵母表达系统之比较经验共享毕赤酵母表达系统机制/原理毕赤酵母能够高效的表达外源基因，是因为其具有强启动子乙醇氧化酶启动子（AOX1和AOX2）。AOX1和AOX2 及其产生的Muts和Mut+表现型前文已经叙述过。AOX1受甲醇的诱导和葡糖糖或甘油的抑制。毕赤酵母表达的酵母蛋白表达系统